期刊简介
本刊主要报道国内外男科学、生殖医学最新研究诊治进展,有关男女不育症、性功能障碍、前列腺疾病等诊治与研究动态、实验诊断方法、男科重要新闻、重大学术活动、出版消息、书刊评论等。杂志入选中国科技论文统计源期刊和中国核心引文医学类核心期刊,并被美国CA、Medline收录。
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首页>中华男科学杂志

- 杂志名称:中华男科学杂志
- 主管单位:南京军区联勤部卫生部
- 主办单位:南京军区南京总医院
- 国际刊号:1009-3591
- 国内刊号:32-1578/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:国家科技部中国科技论文统计源期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 维普收录(中)
骨髓间充质干细胞的分离培养及在精原细胞培养条件下生物学特征的观察
刘风华;杨冬梓;王沂峰;梁晓萍;彭文明;曹长安;陈系古;郭忠敏
关键词:骨髓间充质干细胞, 细胞培养, 精原细胞, 生物学特征
摘要:目的:体外分离、培养、纯化小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),并观察MSCs在精原细胞培养条件下的生物学特征,为体内诱导MSCs分化为精原细胞奠定基础.方法:①分离5~6周龄的BALB/c小鼠胫骨、股骨,冲出骨髓,以Percoll密度梯度离心法和贴壁法相结合的方法分离、培养、纯化MSCs;②通过动态观察、苏木精-伊红(HE)染色、透射电镜观察、免疫组化检测细胞表面标记等鉴定MSCs;③用ELISA法检测MSCs培养上清中白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、干细胞因子(SCF)等细胞因子的相对含量,与相应对照组比较;④取第3代MSCs,分组进行诱导培养观察,对照组用基本培养液培养MSCs,实验组用条件培养液诱导培养MSCs.通过显微镜下动态观察、HE染色、免疫组化等方法观察诱导结果.结果:①获得纯化的MSCs;②动态观察培养细胞具有不断增殖的干细胞特性,HE染色细胞呈梭形,透射电镜观察细胞较幼稚,免疫组化检测细胞表面标记CD44、CD90呈阳性,从而鉴定了MSCs;③MSCs培养上清中IL-6、IL-8、G-CSF、SCF等的含量显著高于对照组(P<0.05);④实验组细胞形态发生变化,CD29、CD117和Oct-4免疫组化染色阳性;对照组细胞形态不变,CD29、CD117和Oct-4免疫组化染色阴性.结论:①用Percoll密度梯度离心法和贴壁法相结合的方法可获得纯化的MSCs;②通过动态观察细胞特性、HE染色、透射电镜观察、免疫组化检测细胞表面标记等可鉴定MSCs;③MSCs能分泌IL-6、IL-8、G-CSF、SCF等细胞因子;④MSCs在精原细胞培养条件下诱导培养,能表现出精原细胞的一些生物学特征.
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