期刊简介
本刊主要报道国内外男科学、生殖医学最新研究诊治进展，有关男女不育症、性功能障碍、前列腺疾病等诊治与研究动态、实验诊断方法、男科重要新闻、重大学术活动、出版消息、书刊评论等。杂志入选中国科技论文统计源期刊和中国核心引文医学类核心期刊，并被美国CA、Medline收录。
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首页>中华男科学杂志
- 杂志名称：中华男科学杂志
- 主管单位：南京军区联勤部卫生部
- 主办单位：南京军区南京总医院
- 国际刊号：1009-3591
- 国内刊号：32-1578/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：国家科技部中国科技论文统计源期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 维普收录(中)
昆虫细胞杆状病毒表达系统表达重组人类ZP3蛋白的研究
卢慧；刁华；肖玉芳；于合国；李铮；施惠娟
关键词：人ZP3, 精子, 重组蛋白, 昆虫细胞杆状病毒表达系统
摘要：目的:探讨利用重组表达系统制备重组人类ZP3(hZP3)蛋白的方法和技术难点,为hZP3蛋白的制备和应用打下技术基础. 方法:构建hZP3的载体质粒pFASTBAC HTa-hZP3,在大肠杆菌宿主细胞中利用杆状病毒Bac-to-Bac系统同源重组构建重组的杆状病毒穿梭载体Baemid,用重组的Bacmid转染Sf9细胞制备重组杆状病毒,分别表达带HIS标签的hZP3全长蛋白(氨基酸1～424)和截短的hZP3蛋白(氨基酸23～ 348).摸索重组hZP3蛋白的表达时间和纯化制备方法. 结果:成功制备了表达重组人hZP3全长蛋白和截短体蛋白的Bacmid和杆状病毒颗粒,Western印迹检测表明,在Sf9细胞中较好的表达时间段为感染后72 ～96 h.重组表达的hZP3蛋白可以部分被钴柱亲和纯化,大量的重组hZP3蛋白不能结合到亲和介质而流穿,但确切的原因还未知.纯化得到的hZP3经荧光素Dylight Dye488标记,能与人精子结合. 结论:利用昆虫细胞杆状病毒表达系统表达hZP3蛋白是可行的,可以进一步优化,但hZP3蛋白的有效富集和纯化方法是大的瓶颈,还需要进一步摸索.
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