期刊简介

  本刊主要报道国内外男科学、生殖医学最新研究诊治进展,有关男女不育症、性功能障碍、前列腺疾病等诊治与研究动态、实验诊断方法、男科重要新闻、重大学术活动、出版消息、书刊评论等。杂志入选中国科技论文统计源期刊和中国核心引文医学类核心期刊,并被美国CA、Medline收录。

     

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  • 杂志名称:中华男科学杂志
  • 主管单位:南京军区联勤部卫生部
  • 主办单位:南京军区南京总医院
  • 国际刊号:1009-3591
  • 国内刊号:32-1578/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:国家科技部中国科技论文统计源期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 维普收录(中)
中华男科学杂志2017年第06期

改良免疫磁珠结合克隆法培养SD大鼠阴茎海绵体内皮细胞

张范波;姜睿

关键词:大鼠, 阴茎海绵体, 内皮细胞, 磁珠, 克隆
摘要:目的:探索大鼠阴茎海绵体内皮细胞(CCECs)分离、纯化和培养的方法,观察其生长特性,并为勃起功能障碍的研究提供种子细胞. 方法:采用0.1%弹性蛋白酶消化SD大鼠阴茎海绵体组织,分离原代SD大鼠CCECs,然后采用免疫磁珠纯化,进一步扩增,利用克隆环筛选出单克隆CCECs,并观察其形态及增殖特性,免疫荧光染色鉴定CCECs血管假性血友病因子(VWF)、免疫组化染色鉴定CCECs CD31分子,流式细胞仪测定CCECs纯度,CCK-8法检测CCECs细胞增殖并绘制生长曲线. 结果:经克隆环筛选纯化培养1周后倒置相差显微镜下观察到CCECs生长汇合呈铺路石样改变.生长曲线显示CCECs初1~2d处于潜伏期,生长缓慢,3~4d处于对数生长期,生长迅速,第6天进入平台期.免疫荧光染色检测CCECs VWF呈阳性,荧光显微镜下胞质内可见大量绿色荧光.免疫组化检测CCECs CD31分子呈阳性,倒置显微镜下胞质内可见大量黄褐色颗粒.流式细胞仪检测经磁珠联合克隆环纯化VWF标记的CCECs细胞阳性率可达(91.9±3.75)%. 结论:免疫磁珠联合克隆环纯化法可成功培养出纯度高SD大鼠CCECs,并可在内皮细胞培养液中稳定生长及传代.